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使用ELISA檢測(cè)試劑盒的作用原理及注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2024-10-14瀏覽:1026次

  使用ELISA檢測(cè)試劑盒的作用原理及注意事項(xiàng)


  ELISA檢測(cè)試劑盒可實(shí)現(xiàn)多種分泌性蛋白(細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等)的同時(shí)檢測(cè)和定量,對(duì)于生物系統(tǒng)的綜合研究而言具有寶貴價(jià)值。不但具有更優(yōu)的效率、速度和檢測(cè)范圍。采用多重檢測(cè)能降低每個(gè)靶標(biāo)結(jié)果的成本。

  ELISA檢測(cè)試劑盒的作用原理:

  1. 抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,或是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;

  2. 抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;

  3. 酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。

  ELISA檢測(cè)試劑盒使用注意事項(xiàng):

  1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。

  2.顯色問(wèn)題: 使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng),都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況。

  3.加樣中可能遇到的問(wèn)題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理。

  4.洗板時(shí)容易造成誤差: 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹模耘袛嗍裁磿r(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)。

  5.終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒。

  6.讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈。

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