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牛白細(xì)胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/6/5瀏覽:113次
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  以下是天津本生牛白細(xì)胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒的實(shí)驗說明書核心內(nèi)容整理,綜合多個來源信息:

  檢測原理?

  采用雙抗體夾心法(ELISA):

  預(yù)包被抗牛IL-10抗體的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白。

  加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成復(fù)合物,TMB顯色(藍(lán)色→黃色)。

  通過450nm波長測定OD值,計算濃度。

  樣本處理要求?

  類型?:血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿。

  處理方法?:

  血清/血漿?:3000轉(zhuǎn)離心10-30分鐘分離,避免溶血或高脂血。

  組織勻漿?:生理鹽水搗碎后離心取上清。

  保存?:分裝后-20℃凍存,避免反復(fù)凍融。

  試劑盒組成?

  組分 規(guī)格/數(shù)量 備注

  預(yù)包被微孔板 12孔×8條 可拆卸

  標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml(濃度梯度) 需稀釋

  HRP標(biāo)記抗體 6ml 避光保存

  TMB顯色液 A液+B液各6ml 現(xiàn)配現(xiàn)用

  終止液 6ml 酸性溶液

  濃縮洗滌液 20ml(30倍稀釋) 使用前稀釋

  操作步驟?

  平衡試劑?:室溫放置15-30分鐘。

  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如40ng/L→20ng/L→10ng/L)。

  加樣與孵育?:

  加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本(100μl/孔),37℃孵育60分鐘。

  洗滌?:手工或自動洗板5次。

  顯色與終止?:

  加入TMB避光反應(yīng)15分鐘,終止后立即檢測OD值。

  注意事項?

  靈敏度與范圍?:典型檢測范圍15.6-1000 pg/mL,靈敏度因品牌差異。

  交叉反應(yīng)?:與牛IL-10類似物無顯著交叉。

  保存條件?:未開封試劑盒2-8℃保存,開封后板條需密封防潮。

  禁止檢測?:含NaN3的樣本(抑制HRP活性)。

  數(shù)據(jù)計算?

  以標(biāo)準(zhǔn)品OD值繪制曲線,擬合方程計算樣本濃度。

  注:以上資料僅供參考,如需完整說明書,請參考試劑盒附帶文檔或聯(lián)系供應(yīng)商。

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